减蛋下降综合征病毒重组 Knob-S 基因在杆状病毒系统中的表达及其免疫原性鉴定

• 作者: 候继波 唐应华 郑金 陆吉虎 陈滔 高峰 黎满香
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 减蛋下降综合征病毒 重组Knob-S 真核表达 杆状病毒表达系统
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医?水产养殖
• 页码范围: 600-603
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3046字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2015.03.022

摘要

为以杆状病毒系统在Sf9细胞中表达含减蛋下降综合征病毒( EDSV)重组Knob-S蛋白质来制备亚单位疫苗,采用PCR方法从鸭胚繁殖的EDSV尿囊液中扩增Knob-S基因,并克隆到pFastBac1中,经转化DH10Bac获得重组rBac-Knob-S。将rBac-Knob-S转染Sf9细胞获得重组杆状病毒,利用重组杆状病毒感染Sf9细胞表达重组蛋白质。重组Knob-S蛋白质经Western blotting和间接免疫荧光试验鉴定均为阳性。将重组Knob-S蛋白质制备成疫苗,按1羽0.3 ml(含50μg的重组病毒)免疫6周龄非免海兰褐雏鸡,在免疫后第2周可检测到血凝抑制抗体效价达8.5 lg2,在第3周达到高峰(9.5 lg2),表明重组Knob-S蛋白质具有较好的免疫原性。