蛋白激酶C参与内源性大麻素1型受体对心肌L型钙电流的抑制作用

• 作者: 张彦敏 李茜 段丽红
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 内源性大麻素1型受体 蛋白激酶C L型钙电流 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-26
• 页数: 5页
• 分类号: R962
• 字数: 3952字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2015.01.004

摘要

目的 研究激活心肌内源性大麻素1型(CB1)受体是否通过改变蛋白激酶C(PKC)活性从而抑制L型钙电流,探讨激活CB1受体导致PKC活性变化的信号途径.方法 利用酶解法制备大鼠心室肌细胞,分别单独应用CB1受体特异性激动剂2-氯乙胺花生四烯酸(ACEA) 100 nmol· L-1、CB1受体阻断剂AM251 100 nmol·L-1或PKC非特异性激动剂十四烷酸乙酸大戟二萜醇酯(PMA) 500 nmol·L-1孵育细胞10 min;此外提前应用AM251或PMA孵育细胞5 min后,再用ACEA孵育细胞10 min.应用全细胞膜片钳技术记录单个心肌细胞的L型钙电流;应用PepTag非放射性蛋白激酶C检测系统检测细胞PKC活性;ELISA试剂盒测定细胞中二酰甘油(DAG)的含量;Western蛋白印迹法测定磷脂酶Cβ(PLCβ)和磷酸化磷脂酶Cβ (p-PLCβ)表达.结果 给予ACEA激动大鼠心肌细胞的CB1受体,可显著抑制L型钙电流,最大峰值电流密度由11.4±0.8降至(6.4± 1.5) pA· pF-1;预先给予AM251或PMA可以完全阻断此抑制效应.检测心肌细胞PKC活性发现,与正常对照组(1.59±0.50) μmol·min-1·L-1相比,ACEA组心肌细胞PKC活性为(0.69±0.48) μmol·min-1·L-1,明显降低;同样预先给予AM251或PMA完全阻断ACEA对PKC活性的抑制效应.而给予ACEA没有影响心肌细胞DAG含量和PLCβ的磷酸化.结论 激活心肌细胞CB1受体后抑制细胞PKC的活性,从而抑制L型钙电流,此过程没有PLCβ-DAG途径参与.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张彦敏	河北医科大学基础医学院生理教研室	14	47	3.0	6.0
3	段丽红	石家庄市第四医院妇产科	11	45	5.0	6.0
4	李茜	河北医科大学基础医学院生理教研室	18	113	6.0	10.0