肝素诱导的树突状细胞上调Toll羊受体3促进慢性乙型肝炎患者外周血Th0向Th1分化

• 作者: 孙伟红 李长优 牛爱荣 赵鹏 高岱清 魏晓芳
• 来源期刊: 中华肝脏病杂志
• 关键词: 肝炎,乙型,慢性 Toll样受体3 肝素 树突状细胞 Th1
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 病毒性肝炎
• 页码范围: 658-662
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-3418.2015.09.005

摘要

目的 探讨肝素体外诱导的树突状细胞(DC)促进慢性乙型肝炎(CHB)患者CD4+T细胞亚群由Th0向Th1分化的机制. 方法 分离CHB患者外周血单个核细胞,以重组人白细胞介素(rhIL)-4、重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和肝素诱导培养DC.流式细胞仪和定量PCR检测肝素处理及未处理的DC中Toll样受体(TLRs)分子表达水平.对高表达的TLRs,用TLRs-siRNA干扰处理后检测DC的功能变化.免疫磁珠分离外周血CD4+T细胞亚群.酶联免疫吸附(ELISA)法检测Poly(I∶C)和R848刺激后DC上清液中IL-12及DC和CD4+T细胞混合培养上清液中干扰素(IFN)v和IL-4的含量.均数的比较采用配对t检验.结果 肝素处理的DC (heparin-DC)其TLR3表达水平明显高于未处理的DC (t=2.849,P＜0.05;t=3.027,P＜ 0.05);而两组间TLR7和TLR8的表达水平差异无统计学意义;Heparin-DC在Poly(I∶C)刺激下分泌IL-12水平明显高于未处理的DC(t=8.68,P＜0.01),同时高于R848刺激的heparin-DC(t=19.01,P＜0.01);经TLR3-siRNA干扰后,heparin-DC分泌的IL-12水平明显降低(t=31.49,P＜0.01).TLR3-siRNA干扰后的heparin-DC与同种异体的CD4+T细胞共培养,其CD4+IFN Y +T细胞比例与未干扰组相比明显降低(1.64％±0.57％对比6.31％±0.88％,P＜0.01),同时其上清液中Thl型细胞因子IFNY的水平也显著降低(t=20.83,P＜0.01),而IL-4分泌水平变化无统计学意义.结论 肝素在体外可能通过上调CHB患者树突状细胞TLR3的表达水平而促进外周血Th0向Th1细胞的分化.