纳米磁球法分离检测甲胎蛋白变异体方法的建立及应用

• 作者: 俞菁 梁俊 梁晓飞 胡晶莹 胡荷宇 陈复华 龚波
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤 甲胎蛋白类 实验室技术与方法 植物凝集素类 金属纳米粒子
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 临床经验
• 页码范围: 1380-1386
• 页数: 7页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2015.44.911

摘要

目的:建立一种简便、快速和高敏感度检测甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)变异体AFP-L3的新方法.方法:采用薄膜蒸发法制备扁豆凝集素(lens culinaris agglutinin,LCA)修饰的纳米功能磁球(LCA-纳米功能磁球),并通过磁性作用分离结合AFP-L3的LCA-纳米功能磁球,从而富集AFP-L3.结合人AFP定量检测试纸(时间分辨荧光法)检测AFP-L3的浓度,建立基于纳米功能磁球的AFP-L3检测方法.采用AFP-L3标准品比较LCA-纳米功能磁球法和已商品化的亲和离心层析柱法对AFP-L3的回收率,并应用上述2种方法分别检测了64例AFP阳性肝癌患者血清中AFP-L3的浓度并比较检测结果.选择830例血清样品,包括100例正常健康人群,300例慢性肝炎患者、228例肝硬化患者和202例肝癌患者,采用LCA-纳米功能磁球检测AFP-L3浓度,并比较各组的差异.结果:成功制备获得LCA偶联的纳米功能磁球,并建立了纳米磁球提取AFP-L3的方法.与亲和层析离心柱提取AFP-L3的方法进行比较,在AFP-L3浓度较高(4 000 ng/mL)时,LCA-纳米功能磁球法对AFP-L3的回收率显著优于亲和层析离心柱法(P＜0.05),而在低浓度时两者的回收率相当.64例AFP阳性肝癌患者血清中AFP-L3的浓度检测结果显示,2种检测方法检测AFP-L3的阳性率均为37.5％,差异无统计学意义(P＞0.05).830例临床样本的检测结果显示,正常健康人群、慢性肝炎患者、肝硬化患者以及肝癌患者血清中AFP和AFP-L3的双阳性率分别为0.0％、3.3％、19.7％和60.9％,肝癌患者的阳性率明显高于良性肝病患者或正常人健康人群,和已报道结果一致.结论:采用LCA修饰的纳米功能磁球通过自动化提取AFP-L3的方法是一种准确、高效而简单的检测AFP-L3的方法.