摘要:
目的 观察角膜碱烧伤兔行骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)移植后不同时间受损角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)发生情况,探讨BMSC移植后对碱烧伤CNV的抑制作用.方法 取日本大白兔24只,随机分为实验组和对照组各12只,实验组进行烧伤后BMSC移植,体外分离培养得到BMSC,制备中度角膜碱烧伤模型,随后行BMSC移植.对照组不进行移植.分别于移植后3d、14 d、28 d观察CNV生长状态、计算CNV面积、采用RT-PCR检测角膜中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达情况.结果 BMSC贴壁生长,呈长梭形,CD90呈现高表达(表达率97.94%),CD31低表达(表达率0.15%).BMSC移植后28 d时实验组角膜较对照组明显透亮,新生血管面积显著减小(P<0.05).BMSC移植后14 d、28 d,实验组MMP-2基因条带的灰度值均低于对照组(均为P<0.05),实验组MMP-2 mRNA表达低于对照组且14 d时差异最明显(P<0.01).BMSC移植后3d,实验组TNF-α基因条带灰度值较对照组低,实验组TNF-α mRNA的表达明显受到抑制,且两组间差异有统计学意义(P <0.05);14 d时,实验组TNF-α基因表达仍低于对照组(P<0.05),28 d时实验组与对照组TNF-α mRNA表达量相当,差异无统计学意义(P>0.05).结论 BMSC通过抑制MMP-2的表达,减少细胞外基质的溶解,抑制CNV的形成;通过降低炎性细胞因子TNF-α的表达,减轻局部炎症反应,从而抑制CNV的生长.