三种 DNA 提取方法对检测草莓镶脉病毒稳定性的研究

• 作者: 冉策 刘正坪 尚巧霞 赵晓燕 陆家兰 陈柳 魏艳敏
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 植物DNA提取 CTAB试剂盒 高盐低pH法 SDS法
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 页码范围: 200-204
• 页数: 5页
• 分类号: S432.4+1
• 字数: 3778字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2015.03.034

摘要

草莓成熟叶片中含有大量的多糖、蛋白质、多酚和色素等物质，影响高质量DNA的提取和下游PCR反应的进行。为确定适用于PCR技术检测草莓镶脉病毒（ Strawberry vein banding virus，SVBV）的DNA提取方法，从草莓叶片中提取DNA后，对样品中的SVBV进行特异性的PCR检测，比较确定不同DNA提取方法对PCR检测SVBV稳定性的影响。以感染SVBV的草莓叶片为材料，分别采用CTAB试剂盒法、高盐低pH法、改良SDS法提取草莓叶片的总DNA，将不同方法提取的DNA通过紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法进行测定，对DNA产量和质量进行分析。结果表明，3种方法均能获得较为完整的DNA片段，用CTAB试剂盒提取的DNA质量最高，改良SDS法提取的DNA质量较低。将不同方法提取的DNA经过PCR反应特异性检测SVBV后，将与目的片段大小一致的PCR扩增产物经序列测定及分析，证明与SVBV的序列相吻合，证明了方法的可靠性，其质量能够满足PCR特异性检测需要。