禽网状内皮组织增殖病病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR检测方法的建立

• 作者: 牛秀杰 王云峰 薛美 赵妍
• 来源期刊: 黑龙江农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: SYBR Green Ⅰ 实时荧光PCR 禽网状内皮增殖病毒 gag基因 LTR基因
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产
• 页码范围: 47-52
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65+9.3
• 字数: 4319字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11942/j.issn1002-2767.2015.04.0047

摘要

为了探究禽网状内皮组织增殖病的快速检测方法,根据禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)LTR和gag基因的保守区域各设计并合成一对引物,建立检测插入感染与全病毒感染的SYBR Green Ⅰ模式的实时荧光PCR方法(Real-time PCR).以pMD-LTR,pMD-gag重组质粒为标准品建立标准曲线,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行评价.结果表明:该方法线性关系良好;敏感性能检测到10拷贝标准品;能特异性检测REV样品,不与其它禽相关病原发生交叉反应;板内、板间重复试验的变异系数均低于3％.应用该方法对人工感染REV的鸡的心、肝、脾、肺、肾、盲肠扁桃体、腺胃和法氏囊进行初步检测,结果显示法式囊中的含量最高.