线粒体通透性转换孔在心肌细胞胆碱能抗炎通路中的作用

• 作者: 刘高谱 孙超 崔昕龙 廖旭 李瑞萍 杨桂珍 王世玉 程怡 薛富善
• 来源期刊: 中华麻醉学杂志
• 关键词: 线粒体膜转运蛋白质类 乙酰胆碱 迷走神经 心肌再灌注损伤 肌细胞,心脏
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 重症医学
• 页码范围: 993-997
• 页数: 5页
• 字数: 3717字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1416.2015.08.023

摘要

目的 探讨线粒体通透性转换孔(mPTP)在心肌细胞胆碱能抗炎通路中的作用.方法 乳鼠心肌细胞培养72 h后,采用随机数字表法将其分为5组(n=36):空白对照组(C组)、缺氧复氧组(A/R组)、特异性α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂PNU282987组(P组)、mPTP开放剂苍术苷组(ATR组)和PNU282987+ATR组(P+A组).采用不含血清的低糖DMEM,置于厌氧培养盒中(O2浓度＜0.1％)缺氧6h后,更换为含10％胎牛血清的高糖培养基,置于37 ℃、常氧、5％ CO2培养箱中复氧6h,以制备缺氧复氧损伤模型.P组和ATR组于复氧即刻,分别在培养基中加PNU282987(终浓度为30 μmol/L)和苍术苷(终浓度为20 μmol/L).P+A组于复氧即刻在培养基中加入PNU282987(终浓度30 μmol/L)和苍术苷(终浓度20 μmol/L).于复氧6h时测定心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、凋亡率、NF-κB p65和磷酸化NF-κB p65 Ser536(p-NF-κB p65 Ser536)表达水平、培养液IL-6和TNF-α的浓度和线粒体膜电位.结果 与C组相比,A/R组、P组、ATR组和P+A组LDH漏出率、早期和晚期细胞凋亡率升高,培养液IL-6和TNF-α浓度升高,心肌细胞NF-κB p65和p-NF-κBp65 Ser536表达上调,线粒体膜电位降低(P＜0.01);与A/R组相比,P组LDH漏出率和早期细胞凋亡率降低,培养液IL-6和TNF-α浓度降低,心肌细胞p-NF-κB p65 Ser536表达下调,线粒体膜电位升高,ATR组LDH漏出率和早期细胞凋亡率升高,培养液IL-6和TNF-α浓度升高,心肌细胞p-NF-κBp65 Ser536表达上调,线粒体膜电位降低,P+A组早期细胞凋亡率降低,培养液IL-6和TNF-α浓度降低,心肌细胞p-NF-κBp65 Ser536表达下调(P＜0.05或0.01),LDH漏出率、晚期细胞凋亡率和线粒体膜电位差异无统计学意义(P＞0.05);与P组相比,P+A组LDH漏出率和晚期细胞凋亡率升高,培养液IL-6和TNF-α浓度升高,心肌细胞p-NF-κBp65Ser536表达上调,线粒体膜电位降低(P＜0.05).结论 胆碱能抗炎通路通过抑制mPTP开放产生抗炎作用,从而减轻心肌细胞缺氧复氧损伤.