采用X射线衍射解析人鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(RaIGDS)Ras结合结构域的空间结构

• 作者: 刘珂 刘艳丽 张巍 沈阳 祁超 赵浩斌 雷明 黄雪英
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(RalGDS) Ras结合结构域(RBD) Ras蛋白
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 893-898
• 页数: 6页
• 字数: 4623字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11895/j.issn.0253-3820.150102

摘要

Ras结合结构域(RBD)是鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(RalGDS)家族成员C-端的高保守区,通过它连接Ras和Ras相关蛋白.利用Red Wings和SGC-1 screens相关的悬滴法设盘结晶,按体积比1∶1加蛋白液到含1∶100胞内蛋白酶Glu-C(w/w)的结晶溶液(2 mol/L(NH4)2 SO4,0.2 mol/L NaAc,0.1 mol/L HEPES,5％ MPD,pH 7.5)中,晶体3天长成可组装大小.利用X-射线晶体衍射技术解析了人RalGDS的Ras结合域(RalGDS-RBD)的晶体结构,对比鼠和人RalGDS-RBD,主要是Ras结合区的C-端不同.人RalGDS-RBD通过Glu838和Glu840在RalGDS和Ras蛋白间形成氢键,而在同一位点,鼠RalGDS-RBD通过Asp820和Asp822形成氢键.人RalGDS-RBD结构中含ββαββαβ-型三维结构的泛素样构象,一个单体的C-端残基与相邻单体的β折叠形成平行βββββ结构.