阿司匹林体外抑制破骨细胞生成的分子机制研究

• 作者: 刘斌 吴子祥 张文强 曾艳平 杨红军 杨超 桑宏勋 樊勇 白博 苏菲
• 来源期刊: 中国骨质疏松杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 阿司匹林 破骨细胞 NF-κB MAPKs 骨质疏松
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 275-280
• 页数: 6页
• 分类号: R965.2
• 字数: 4119字
• 语种: 中文

摘要

目的：探讨阿司匹林对破骨细胞生成的影响及其分子机制。方法体外培养RAW264.7细胞，以100 ng／ml核激活因子κB（NF-κB）受体配体（RANKL）诱导培养，并同时添加不同溶度的阿司匹林（0，0.25，0.5，1.0，1.5 mmol／L）培养5天。在不同时间点，通过抗酒石酸酸性磷酸酶（ TRAP）染色的方法来观察破骨细胞诱导生成能力，用实时荧光PCR方法检测其破骨细胞系标志基因，包括组织蛋白酶K（CTSK）、TRAP、基质金属蛋白酶9（MMP-9）和降钙素受体（CTR）mRNA的表达。裂解不同培养条件的细胞并提取蛋白上样，行western印迹检测NF-κB通道蛋白的表达以及有丝分裂原激活蛋白激酶（ MAPKS）通道蛋白的表达，通过免疫荧光的方法分析确定NF-κB 的P65的核易位。结果阿司匹林抑制RANKL诱导的破骨细胞生成，随着阿司匹林浓度增加，破骨细胞形成数量明显减少；其标志性基因TRAP、CTSK、MMP9及CTR的mRNA表达均有所下调；磷酸化的P65、P50、IKB-a、P38以及氨基端激酶（ C-JNK）和胞外信号调节蛋白激酶（ ERK）蛋白表达均有所减少，而其非磷酸化的蛋白表达水平无明显变化。阿司匹林同时对NF-KB P65的核易位也表现出抑制效果。结论在RAW264.7细胞系中，阿司匹林通过抑制NF-κB系统（ P65、P50、IKB-a）和MAPKS系统（ P38、C-JNK和ERK）通道的激活来抑制破骨细胞的生成，且在一定范围内和阿司匹林浓度呈正相关。阿司匹林可能具有临床预防及治疗骨质疏松的潜能。