中东呼吸综合征冠状病毒S1蛋白在昆虫细胞中的重组表达及免疫效果评价

• 作者: 于虹 周育森 太万博 孙世惠 潘婷 赵光宇 邱洪杰 郭彦
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 中东呼吸综合征冠状病毒 S1蛋白 昆虫细胞 杆状病毒表达系统
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 199-202
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R183
• 字数: 3131字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2015.02.010

摘要

目的：利用昆虫杆状病毒表达系统重组表达中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）S1蛋白，并对其免疫效果进行评价。方法：构建含有MERS-CoV S1基因的重组杆状病毒质粒，转染Sf9细胞包装杆状病毒；重组病毒传代3次获得种子病毒，感染Sf9细胞，收获感染上清，通过镍离子亲和层析纯化获得S1重组蛋白；用纯化的S1蛋白免疫BALB/c小鼠，采用ELISA检测免疫小鼠血清抗原特异性的抗体水平；采用假病毒中和试验检测血清中抗体的中和活性。结果：获得了表达MERS-CoV S1蛋白的重组病毒株，在昆虫细胞中表达并纯化了S1重组蛋白；利用重组表达的S1蛋白免疫小鼠3次，血清S1特异性IgG抗体滴度可达1∶102400，免疫小鼠血清稀释至1/5120后中和百分比仍达50%以上。结论：利用昆虫细胞重组表达的MERS-CoV S1蛋白具有良好的免疫原性，并能有效诱导产生高滴度中和抗体，为发展MERS-CoV重组蛋白疫苗奠定了基础。