稳定同位素编码衍生-分散液液微萃取-超高效液相色谱-三重四极杆质谱检测大鼠脑微透析液中左旋多巴和多巴胺

• 作者: 亓伟梅 亓永 孙志伟 尤进茂 索有瑞 赵先恩 陈光
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 大鼠活体微透析 质谱增敏分析 超高效液相色谱 首乌方 药物筛选 帕金森病
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 981-987
• 页数: 7页
• 分类号: O658
• 字数: 5391字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1123.2015.04049

摘要

帕金森病（ PD）大鼠脑微透析液中左旋多巴（ L?DOPA）和多巴胺（ DA）的高灵敏检测技术，是PD相关的临床医学及L?DOPA减毒增效协同药物筛选必不可少的手段。采用d0／d3?10?甲基?吖啶酮?2?磺酰氯（ d0／d3?MASC）作为稳定同位素编码衍生试剂，联合超声波辅助?分散液液微萃取（ UA?DLLME）技术，建立并验证了超高效液相色谱?串联质谱（ UHPLC?MS／MS）快速检测L?DOPA和DA的分析方法。分别使用d0?MASC和d3?MASC衍生微透析液样品和混合对照品，将衍生溶液混合后采用UA?DLLME技术富集净化，继而进行UHPLC?MS／MS检测（多反应监测模式），以d3?MASC衍生物作为d0?MASC衍生物的内标物进行定量。实验表明，在乙腈／水（ pH 10?8碳酸钠?碳酸氢钠缓冲液）溶液中37℃下反应3?0 min后衍生化反应完成，梯度洗脱条件下2?0 min可完成分离检测，线性范围为0?20～1500?0 nmol／L，相关系数大于0?994， L?DOPA 和 DA 的检出限（ S／N＝3）分别为0?005和0?009 nmol／L。分析方法评价结果良好，与已报道方法相比在灵敏度、分析速度和抗基质干扰等方面具有优势，本方法已成功应用于测定中药方剂首乌方对PD大鼠脑微透析液中L?DOPA和DA浓度波动的影响。