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摘要:
目的:构建靶向CIP2A的shRNA真核表达质粒并探讨其对胃癌细胞增殖的调节作用。方法根据siRNA原理设计4对靶向CIP2A的siRNA序列,克隆到真核表达载体pGPU6/GFP/Neo中(shRNA-1、2、3和4)。脂质体转染人胃癌细胞系BGC-823,real-time PCR和Western blot法检测并筛选最佳抑制效率的shRNA表达质粒,CCK-8法检测对胃癌细胞增殖的影响。结果4个靶向CIP2A的shRNA真核表达质粒经限制性酶切和测序证实基因已正确插入,转染效率可达到70%以上。转染后24、48和72 h,4个质粒均明显降低BGC-823细胞内CIP2A mRNA 和蛋白的表达。相较于其他3个重组质粒,shRNA-1的抑制作用更为显著,且对胃癌细胞增殖有明显的抑制作用( P<0.05)。结论成功构建的靶向CIP2A的shRNA真核表达质粒,可有效抑制胃癌细胞CIP2A的mRNA和蛋白表达,并抑制胃癌细胞的增殖,为今后研究CIP2 A在胃癌中的作用机制奠定了基础。
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文献信息
篇名 CIP2A shRNA真核表达载体的构建及其对胃癌细胞增殖的抑制作用
来源期刊 基础医学与临床 学科 医学
关键词 CIP2A 短发卡RNA 胃癌 蛋白磷酸酶2A
年,卷(期) 2015,(2) 所属期刊栏目 研究论文
研究方向 页码范围 162-166
页数 5页 分类号 R735.2
字数 2569字 语种 中文
DOI
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作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 师海蓉 江汉大学医学院病理学与病理生理学教研室 17 37 4.0 5.0
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CIP2A
短发卡RNA
胃癌
蛋白磷酸酶2A
研究起点
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
基础医学与临床
月刊
1001-6325
11-2652/R
大16开
北京东单三条5号
82-358
1981
chi
出版文献量(篇)
7613
总下载数(次)
10
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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