腹水来源卵巢上皮性癌细胞系中侧群细胞的分离、鉴定及耐药性分析

• 作者: 于晓伟 张松灵 王医术 魏振彤
• 来源期刊: 中华妇产科杂志
• 关键词: 卵巢肿瘤 肿瘤干细胞 侧群细胞 抗药性,肿瘤 细胞系,肿瘤 ATP结合匣式转运子
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 452-457
• 页数: 6页
• 字数: 5640字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2015.06.010

摘要

目的：由已建立的腹水来源卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞系中分离侧群（SP）细胞，鉴定SP细胞作为肿瘤干细胞样细胞的生物学特征，并对其进行耐药性分析。方法采用流式细胞仪分选该卵巢癌细胞系中的SP细胞；分别在体外分化条件下培养SP及非侧群（NSP）细胞，并分别测定其SP细胞比例用于比较其体外分化及自我更新能力；将SP及NSP细胞接种于非肥胖性糖尿病-严重免疫缺陷（NOD-SCID）小鼠的皮下及腹腔，比较SP及NSP细胞的成瘤率；采用活细胞计数法（CCK-8法）检测SP、NSP及未分选卵巢癌细胞（未分选细胞）对顺铂的耐药性，以50%抑制浓度（IC50）表示。结果分选前的腹水来源卵巢癌细胞中，SP细胞比例为（4.81±0.43）%，从该卵巢癌细胞系中可持续、稳定地分离出SP细胞。SP细胞经体外分化培养，3周后其中SP细胞比例为（4.89±0.33）%，与分选前SP细胞比例相近，两者比较，差异无统计学意义（P>0.05）；而NSP细胞经体外分化培养，3周后其中SP细胞比例仅为（0.10±0.03）%，明显低于分选前SP细胞比例（P<0.01）。皮下接种1.0×103个SP细胞6周后3只小鼠全部成瘤，皮下成瘤率为3/3，而接种1.0×104个NSP细胞12周后3只小鼠均未成瘤，皮下成瘤率为0，两者皮下成瘤率比较，差异有统计学意义（P<0.01）；同时，腹腔接种相同数量的SP、NSP细胞后其成瘤能力与皮下接种后相似；原发肿瘤与移植瘤经HE染色和免疫组化染色显示，原发肿瘤与移植瘤均为卵巢低分化浆液性乳头状囊腺癌，均表达卵巢浆液性乳头状囊腺癌标志物CA125。SP、NSP、未分选细胞的顺铂IC50值分别为（2.33±0.14）、（1.60±0.04）、（1.81±0.03）μg/ml，SP细胞的顺铂IC50值明显高于NSP及未分选细胞（P<0.05）；以上述未分选细胞的顺铂IC50进一步处理后，未分选细胞中SP细胞比例为（40.10±4.22）%，明显高于顺铂处理前的SP细胞比例[为（4.81±0.43）%；P<0.01]；以上述SP细胞的顺铂IC50进一步处理后，SP细胞的存活率为（58.7±3.3）%，再予维拉帕米拮抗后其存活率下降为（7.2±1.3）%，两者比较，差异有统计学意义（P<0.01）。结论腹水来源卵巢癌细胞系中可持续、稳定地分离出SP细胞，分离出的SP细胞占整个肿瘤细胞群体中的极少数，具有自我更新和分化能力，可再现原发肿瘤的表型，具有干细胞样细胞的生物学特征，并且对卵巢癌一线化疗药物顺铂耐药。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王医术	吉林大学第一医院病理生物学教育部重点实验室	55	275	10.0	13.0
2	魏振彤	吉林大学第一医院妇产科	25	148	7.0	11.0
3	于晓伟	吉林大学第一医院妇产科	28	130	6.0	9.0
4	张松灵	吉林大学第一医院妇产科	44	200	7.0	11.0