复合模式介质Capto core 700纯化轮状病毒

• 作者: 包红 周旭 姜英 汪洲 王名强 胡广宏 韩平
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Capto core 700 纯化 轮状病毒
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 72-78
• 分类号: R392-33|R373.2
• 语种: 中文

摘要

目的 采用复合模式介质Capto core 700纯化轮状病毒(rotavirus,RV),去除培养液中的残余细胞宿主蛋白和DNA,提高病毒收率.方法 将RV LH9毒种接种Vero细胞,制备RV原液,澄清、超滤后,用Capto core 700纯化:样品LH9、LH9+150 mmol/L NaCl[以缓冲液A(20 mmol/L PB+150 mmol/L NaCl,pH 7.0)作为缓冲液]上样纯化分别标记为A、B组合,样品LH9+ 300 mmol/L NaCl[以缓冲液B(20mmol/L PB+ 300 mmol/L NaCl,pH 7.0)作为缓冲液]上样纯化标记为C组合,样品LH9+450 mmol/L NaCl[以缓冲液C(20 mmol/L PB+450 mmol/LNaCl,pH 7.0)作为缓冲液]上样纯化标记为D组合,洗脱,收集流穿峰,检测纯化后病毒的滴度和收率、RV RNA、RV抗原性、残余宿主细胞蛋白(HCP)和DNA;并用初步筛选出的纯化组合纯化3批RV超滤浓缩液,检测各项指标,进行进一步验证.结果 用20 mmol/L PB+150 mmol/L NaCL缓冲体系和样品中加入150 mmol/L NaCl的组合纯化RV,病毒收率在80％以上,病毒核酸完整,其抗原性未发生改变,可去除94％以上的HCP,残余DNA符合《中国药典》三部(2010版)标准.结论 Capto core 700纯化RV收率和残余蛋白去除效率均较高,组合B操作相对简便,工艺时间短,病毒收率高,更适于RV的纯化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡广宏		10	22	3.0	4.0
2	包红		20	44	4.0	4.0
3	王名强		10	26	3.0	4.0
4	韩平		6	17	3.0	3.0
5	姜英		12	55	4.0	7.0
6	汪洲		2	6	2.0	2.0
7	周旭		4	4	1.0	2.0