沉默 CD147基因对人乳腺癌 MDA－MB－231细胞的影响

• 作者: 李振乾 李江伟 李道明 秦慧 黄培
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 关键词: 乳腺肿瘤 细胞系,肿瘤 抗原, CD147 基质金属蛋白酶2 金属蛋白酶类组织抑制剂
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 734-738
• 页数: 5页
• 字数: 4497字
• 语种: 中文

摘要

目的：探讨沉默CD147基因对人乳腺癌MDA－MB－231细胞生长、增殖、运动能力的影响。方法构建CD147小干扰RNA（ siRNA）慢病毒载体并转染各实验组MDA－MB－231细胞，采用免疫细胞化学ABC法检测沉默前后MDA－MB－231细胞中CD147、基质金属蛋白酶（ MMP）－2、金属蛋白酶类组织抑制剂（ TIMP）－2蛋白的表达水平；采用即时定量PCR 和Western Blot 技术检测CD147、MMP－2、TIMP－2的mRNA和蛋白表达水平改变；采用CCK－8法和划痕实验分别检测细胞的增殖和迁移能力；建立裸鼠皮下移植瘤模型，观察CD147 siRNA对裸鼠瘤体质量和体积的影响。结果转染MDA－MB－231细胞后，CD147、MMP－2、TIMP－2蛋白呈弱阳性或阴性表达，明显低于对照组（ P＜0．01）。转染72 h时，CD147基因下调平均效率为96．03％±0．84％，MMP－2基因下调平均效率48．64％±0．35％，mRNA表达均明显下降（P＜0．05），而TIMP－2 mRNA表达水平与对照组相比差异无统计学意义（ P＞0．05）。转染第2天后， MDA－MB－231细胞生长明显受到抑制（ P ＜0．05）。转染24 h 后MDA－MB－231细胞平均迁移距离为（0．64±0．12） mm，而空白对照组细胞平均迁移距离为（4．69±0．85）mm，迁移速度减小。沉默CD147基因后，裸鼠瘤体体积和瘤体质量均下降（P＜0．05），平均瘤体质量为（1．85±0．98）g，移植瘤的生长受到抑制（P＜0．05）。结论 CD147可以影响MDA－MB－231细胞中的MMP－2／TIMP－2平衡，沉默CD147基因可以抑制MDA－MB－231细胞的增殖和迁移及裸鼠移植瘤的生长。