人泪腺腺样囊性癌肿瘤干细胞分离培养及特征研究

• 作者: 何彦津 刘勋 吕建美 朱利民 谢连凤
• 来源期刊: 中华眼科杂志
• 关键词: 癌,腺样囊性 泪器 眼肿瘤 肿瘤干细胞 肿瘤细胞,培养的
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 762-767
• 页数: 6页
• 字数: 4610字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4081.2015.10.011

摘要

目的 分离、培养人泪腺腺样囊性癌(LACC)细胞系并研究其肿瘤干细胞(CSC)特性.方法 实验研究.应用无血清悬浮培养法分离培养人LACC-CSC,显微镜下观察细胞形态学改变.实验分为两组,即LACC-CSC实验组和LACC对照组,应用流式细胞仪检测干细胞标记CD133、ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的表达,Tanswell小室检测CSC侵袭力,并诱导CSC向血管内皮细胞分化,体外异种移植检测CSC致瘤力.实验组与对照组组间比较采用t检验.结果 LACC接种于无血清培养基后悬浮成球生长,10～ 12 d可形成形态规则的肿瘤微球体.流式细胞仪检测示LACC-CSC表达CD133比率为(35.67±6.86)％,LACC为(0.46±0.48)％,二者比较差异具有统计学意义(t=-8.867,P＜0.05);LACC-CSC表达ABCG2为(39.99±4.54)％,LACC为(6.75±1.34)％,二者比较差异具有统计学意义(t=-9.932, P＜0.05).Transwell体外侵袭实验示,培养24 h后,LACC-CSC穿过Matrigel基底膜平均为(32.60±8.79)个/高倍镜视野,LACC为(10.20±2.77)个/高倍镜视野,两组比较差异有统计学意义(t=5.433,P＜0.05);培养48 h后LACC-CSC穿过Matrigel基底膜平均为(62.60±4.83)个/HP,LACC为(44.00±5.34)个/HP,两组比较差异有统计学意义(t=5.779,P＜0.05).应用含VEGF和bFGF等的血清培养基低氧诱导,LACC-CSC呈贴壁生长,细胞形态改变,连续诱导后三维基质胶中可形成血管腔样结构,表达血管内皮标记CD31、CD34.体外移植瘤实验LACC-CSC组9d时全部出瘤,LACC组12d全部出瘤,两组成瘤率均为100％.结论 通过无血清培养法获得的LACC-CSC悬浮成球生长,表达经典干细胞标记CD133及ABCG2,具有更强的迁移侵袭力以及体内致瘤力,并具有多向分化潜能,具有干细胞的一般特性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢连凤	江西省赣南医学院附属医院眼科	1	5	1.0	1.0