葡萄糖调节蛋白78对人舌癌细胞侵袭的影响及其机制

• 作者: 刘婷婷 叶丽平 宋佳 宋慧娟 李丹
• 来源期刊: 解放军医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 葡糖糖调节蛋白78 Tca-8113 侵袭
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 374-378,392
• 页数: 6页
• 分类号: Q291|R735.7
• 字数: 4095字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-5227.2015.04.020

摘要

目的：探讨葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78，Grp78)对人舌癌细胞系Tca-8113侵袭的影响及其分子机制。方法应用pcDNA3.1(+)-Grp78重组质粒转染舌癌细胞系Tca-8113筛选得到稳定表达Grp78的克隆(78C6)，再应用siRNA-Grp78转染78C6敲除Grp78表达，应用Transwell实验分析其侵袭能力，免疫荧光和细胞伸展实验检测细胞骨架排列和细胞伸展情况，GST-pulldown技术对Rac1和RhoA活性进行分析，Western blot检测Rac1、RhoA、MMP-9和MMP-2的表达。结果 Transwell实验结果显示，特异性上调Grp78表达明显促进舌癌细胞的侵袭，并且这种促进作用可以被siRNA-Grp78转染抑制，差异有统计学意义(P＜0.05)。进一步的研究发现，与对照组相比，Grp78高表达可以促进舌癌细胞Tca-8113的伸展和极性形成，差异有统计学意义(P＜0.05)。细胞骨架染色结果表明特异性上调Grp78后，细胞骨架微丝主要分布于细胞边缘，而这种作用可以被siRNA-Grp78转染抑制，导致细胞皮质部位出现明显的应力纤维。GST-pulldown结果表明，与对照组相比，Grp78高表达使Rac1的活性水平增高，RhoA活性降低，而siRNA-Grp78转染的细胞中Rac1活性降低，RhoA活性升高。Western blot研究显示，与对照组相比，Tca-8113/Grp78细胞中MMP-2和MMP-9表达增高(P＜0.05)， siRNA-Grp78转染的细胞中MMP-2和MMP-9表达降低(P＜0.05)，而RhoA和Rac1的表达前后无变化。结论 Grp78通过激活Rac1抑制RhoA活性及上调MMP-2和MMP-9表达来促进舌癌Tca-8113细胞的侵袭。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶丽平	辽宁医学院病理生理学教研室	24	117	7.0	8.0
2	李丹	辽宁医学院科学实验中心	22	157	7.0	11.0
3	宋佳	辽宁医学院病理生理学教研室	5	23	3.0	4.0
4	宋慧娟	辽宁医学院科学实验中心	19	40	3.0	4.0
5	刘婷婷	辽宁医学院科学实验中心	1	3	1.0	1.0