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摘要:
开花是植物由营养生长向生殖生长的转换点,该过程受内源基因与环境信号共同调控。FLC(Flowering locus C)和SVP(Short vegetative phase)是开花途径中关键的抑制开花因子。本文利用酵母双杂交技术深入研究白桦开花抑制因子FLC与SVP的自身聚合作用的分子机理。从重组质粒pGBKT7-BpFLC、pGBKT7-BpSVP分别克隆出6个BpFLC截短体[Bp-FLC1(aa1~73)、BpFLC2(aa1~173)、BpFLC3(aa74~173)、BpFLC4(aa60~208)、BpFLC5(aa74~208)和BpFLC6(aa174~208)]和6个BpSVP截短体[BpSVP1(aa1~68)、BpSVP2(aa1~172)、BpSVP3(aa69~172)、BpSVP4(aa60~225)、BpSVP5(aa69~225)和BpSVP6(aa173~225)],分别编码MADS型蛋白的MI、MIK、K、IKC、KC和C域。在酵母Y2HGold菌中,分别共转质粒pGBKT7-BpFLC1~6×pGADT7-BpFLC及pGBKT7-BpSVP×pGADT7-BpSVP1~6。酵母转化子Y2HGold [pGBKT7-BpFLC×pGADT7-BpFLC]、Y2HGold [pGBKT7-BpFLC2~5×pGADT7-BpFLC],可在选择性固体培养基TDO (SD/-Leu/-Trp/-His)、QTO/A (SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade/AbA)上生长,并在QDO/A/X (SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade/AbA/X-α-gal)上长出蓝色菌落,表明BpFLC能与自身及截短体蛋白BpFLC2~5同源结合。此外酵母Y2HGold [pGBKT7-BpSVP×p-GADT7-BpSVP]、Y2HGold [pGBKT7-BpSVP×pGADT7-BpSVP2~5]也能同时激活报告基因AUR1-C、HIS3、ADE2、MEL1,说明BpSVP能与自身及截短体蛋白BpSVP2~5同源结合。对保守区的序列结构进一步分析发现: BpFLC与BpSVP的K域是它们能够同源结合,介导BpFLC与BpSVP自身形成同源二聚体的关键。
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文献信息
篇名 白桦开花抑制因子BpFLC与BpSVP蛋白同源互作域筛选与分析
来源期刊 植物生理学报 学科
关键词 白桦 BpFLC BpSVP 酵母双杂交 截短体 蛋白互作
年,卷(期) 2015,(9) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 1447-1456
页数 10页 分类号
字数 语种 中文
DOI
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作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 杨传平 231 4191 35.0 51.0
2 郑唐春 18 34 4.0 5.0
3 曲冠证 31 54 5.0 5.0
4 代丽娟 9 6 1.0 2.0
5 臧丽娜 12 23 4.0 4.0
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白桦
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植物生理学报
月刊
2095-1108
31-2055/Q
大16开
上海市岳阳路319号31B楼
4-267
1951
chi
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