摘要:
目的 观察载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)对结直肠癌细胞侵袭迁移能力的影响.方法 在结直肠癌细胞系SW48中转染ApoE过表达质粒及其特异性siRNA,实时荧光定量-PCR (Real time-qPCR)检测转染ApoE的表达,利用Transwell小室观察ApoE对细胞侵袭迁移能力的影响,通过免疫印迹检测ApoE对基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)家族蛋白表达的影响.结果 RTPCR检测结果显示:过表达ApoE组细胞中ApoE mRNA水平显著高于空白对照白组和阴性对照组,差异有统计学意义(P=0.008),ApoE沉默组中ApoE mRNA水平与阴性对照组比,差异有统计学意义(P=0.013);Transwell侵袭实验结果显示,穿膜细胞数:空白对照组、阴性对照组、过表达ApoE组、si-ApoE组依次为:(209±17)、(228±11)、(67±9)、(428±15)个/视野,过表达ApoE组和si-ApoE组与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell迁移实验结果显示,空白对照组(326±18)个/视野,阴性对照组(338±21)个/视野,过表达ApoE组(133±11)个/视野,与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),si-ApoE组(518±13)个/视野与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).同时免疫印迹实验显示,过表达ApoE组细胞中MMP-2及MMP-9的表达下降,组织基质金属蛋白酶抑制剂2(tissue inhibitors of metalloproteinase-2,TIMP-2)的表达升高,而si-ApoE组MMP-2及MMP-9表达升高,TIMP-2的表达降低.结论 ApoE可影响结直肠癌细胞的侵袭、迁移能力,并且可能通过影响TIMP-2、MMP-2及MMP-9的表达发挥上述功能.