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膝关节骨性关节炎中WISP-1调控机制的研究
膝关节骨性关节炎中WISP-1调控机制的研究
作者:
吴成爱
姜旭
王莹
赵丹慧
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
膝关节骨性关节炎
软骨细胞
WISP-1
信号传导
细胞外基质
摘要:
目的:使用膝关节骨性关节炎( OA)临床组织标本与人软骨细胞株( NHAC),以分子生物学手法探讨WISP-1在骨关节软骨基质合成和分泌中的调控机理,明确其在骨性关节炎中的作用。方法 NHAC细胞以1.4×106/mL密度播种于6孔板(直径3.5 cm)后培养48 h,于含有0.2%牛血清白蛋白( BSA)的DF中继续培养12 h,使细胞处于静止状态。向含0.02%BSA的DF培养基中加入10、50和100 ng/mL的 Wnt 刺激细胞6 h。对照 siRNA 与β-catenin siRNA,使用 EntranserTM-R ( Engreen)转染试剂转染至NHAC。转染24 h后使用PBS清洗细胞两次。向含0.02%BSA的DF培养基中加入50 ng/mL的Wnt刺激细胞。向NHAC负荷不同剂量WISP-1,24 h后观察MMPs和ADAMTS4。利用总RNA提取试剂盒提取组织标本和细胞RNA,反转录产物cDNA作为PCR扩增模板进行定量PCR;使用蛋白提取试剂盒提取蛋白。结果在膝关节组织标本中发现,在骨性关节炎关节软骨中WISP-1、Wnt和b-catenin基因表达及蛋白水平明显增高。在NHAC细胞,Wnt诱导下WISP-1转录水平显著提高,与Wnt呈现剂量依赖关系。经敲除内源性β-catenin表达后,Wnt诱导WISP-1作用明显降低。 WISP-1以量依存性的诱导细胞外基质蛋白分解酶MMP3、MMP9、MMP13和ADAMTS4基因表达在软骨细胞中Wnt诱导WISP-1信号途径通过β-catenin的可能性很大。结论 WISP-1与骨性关节炎的发生具有一定的相关性;在软骨细胞中Wnt诱导WISP-1的信号途径通过b-catenin。
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文献信息
篇名
膝关节骨性关节炎中WISP-1调控机制的研究
来源期刊
中国骨质疏松杂志
学科
医学
关键词
膝关节骨性关节炎
软骨细胞
WISP-1
信号传导
细胞外基质
年,卷(期)
2015,(5)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
537-540,549
页数
5页
分类号
R684.3
字数
3137字
语种
中文
DOI
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作者信息
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姓名
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赵丹慧
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王莹
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姜旭
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研究主题发展历程
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膝关节骨性关节炎
软骨细胞
WISP-1
信号传导
细胞外基质
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国骨质疏松杂志
主办单位:
中国老年学和老年医学学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1006-7108
CN:
11-3701/R
开本:
大16开
出版地:
北京望京西园三区325楼丙单元601
邮发代号:
82-198
创刊时间:
1995
语种:
chi
出版文献量(篇)
5600
总下载数(次)
8
总被引数(次)
57663
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