shRNA介导沉默肺腺癌转移相关转录本1表达对人卵巢癌细胞株OVCAR3侵袭与转移的影响

• 作者: 吕华兵 周艳清 徐霞英 李娟 温启荣 生秀杰 谭琳玉
• 来源期刊: 肿瘤研究与临床
• 关键词: 卵巢肿瘤 MALAT-1 肿瘤侵润 肿瘤转移 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 664-668,672
• 页数: 6页
• 字数: 3868字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1006-9801.2015.10.004

摘要

目的 检测肺腺癌转移相关转录本1(MALAT-1)在人卵巢癌细胞株中的表达,并探讨shRNA介导沉默MALAT-1表达对卵巢癌细胞OVCAR3生物学功能的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测ES-2、SKOV3、OVCAR3、A2780 4株卵巢癌细胞中MALAT-1mRNA水平的表达差异,设计构建4条特异性干扰MALAT-1表达的shRNA-pGPU6/GFP/Neo表达载体和一条不干扰任何基因表达的空载体作为阴性对照,转染高表达MALAT-1的OVCAR3细胞,qRT-PCR筛选并鉴定有效沉默MALAT-1的shRNA序列.应用CCK-8比色法、体外黏附与划痕实验、Transwell迁移及侵袭实验检测MALAT-1沉默后OVCAR3细胞生长增殖、黏附、划痕修复、迁移及侵袭能力的改变.结果 筛选出高表达MALAT-1的OVCAR3细胞株,有效沉默MALA-1基因后,OVCAR3细胞株的增殖、划痕修复能力明显抑制,黏附能力有不同程度降低.Transwell迁移实验中,干扰组转入底层膜细胞数量为(52.17±4.48)个,低于阴性对照组的(286.50±12.23)个和空白对照组的(295.67±6.96)个;在Transwell侵袭实验中,干扰组转入底层膜细胞数为(37.33±2.40)个,低于阴性对照组的(239.00±15.72)个和空白对照组的(222.67±20.85)个,干扰组与对照组比较差异有统计学意义(P＜ 0.001).结论 利用shRNA介导沉默MALAT-1的表达可以有效抑制卵巢癌细胞株OVCAR3的增殖、黏附、划痕修复以及迁移、侵袭能力,MALAT-1有望成为卵巢癌治疗的有效靶基因.