摘要:
目的 探讨冷保存对大鼠肝内胆管GATA因子表达的影响.方法 用酶消化辅助机械分离方法获得15只SD大鼠肝内胆管组织,将所得胆管片断培养于鼠尾胶原溶液中48 h后进行实验.将SD大鼠按照随机数字表法分为冷保存1h组、冷保存12 h组和对照组,每组5只.采用Real-Time PCR和Western blot检测GATA因子的mRNA和蛋白表达水平.正态分布的计量资料采用(x)±s表示.3组比较采用方差分析,两两比较采用LSD检验.结果 对照组胆管表达GATA3、GATA4、GATA6 mRNA,不表达GATA1、GATA2、GATA5 mRNA.冷保存1h组、冷保存12 h组和对照组GATA4 mRNA的表达水平分别为0.72±0.08、0.56±0.07和0.96±0.06,3组比较,差异有统计学意义(F=38.981,P<0.05).冷保存12 h组GATA4 mRNA的表达水平显著低于冷保存1h组和对照组(P<0.05),冷保存1h组GATA4 mRNA的表达水平显著低于对照组(P<0.05).冷保存1h组、冷保存12 h组和对照组GATA6 mRNA的表达水平分别为0.83±0.07、0.68±0.12和0.98 ±0.12,3组比较,差异有统计学意义(F=10.175,P<0.05).冷保存12 h组GATA6 mRNA的表达水平显著低于冷保存1h组和对照组(P<0.05),冷保存1h组GATA6 mRNA的表达水平显著低于对照组(P<0.05).冷保存1h组、冷保存12 h组和对照组GATA3 mRNA的表达水平变化不明显,分别为0.92±0.06、0.89±0.05和0.98±0.11,3组比较,差异无统计学意义(F=1.674,P>0.05).冷保存1h组、冷保存12 h组和对照组GATA4蛋白的表达水平分别为0.78 ±0.07、0.64±0.06和0.99±0.10,3组比较,差异有统计学意义(F =24.211,P<0.05).冷保存12 h组GATA4蛋白的表达水平显著低于冷保存1h组和对照组(P<0.05),冷保存1h组GATA4蛋白的表达水平显著低于对照组(P<0.05).冷保存1h组、冷保存12 h组和对照组GATA6蛋白的表达水平分别为0.90±0.04、0.75±0.06和0.98±0.11,3组比较,差异有统计学意义(F=11.651,P<0.05).冷保存12 h组GATA6蛋白的表达水平显著低于冷保存1h组和对照组(P<0.05).结论 长时间冷保存后大鼠肝内胆管GATA4和GATA6的表达显著降低,提示GATA4和GATA6参与了冷保存后胆管的病理生理改变过程.