耐甲氧西林表皮葡萄球菌 psm-mec 缺失突变株的构建

• 作者: 刘华 喻华 杨永长 胡洪华 陈亮 黄文芳
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 表皮葡萄球菌 psm-mec 同源重组 突变体 生物被膜形成
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 672-677
• 页数: 6页
• 字数: 4683字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2015.09.007

摘要

目的：构建耐甲氧西林表皮葡萄球菌（ MRSE）的psm-mec缺失突变株，并对psm-mec的功能进行初步研究。方法运用药敏试验、DNA序列分析技术筛选psm-mec上下游序列与S．epi-dermidis标准菌株RP62A完全一致且四环素和氯霉素敏感的MRSE。利用融合PCR和温度敏感性穿梭质粒构建同源重组质粒pBT2-Δpsm-mec，经鉴定后电转金黄色葡萄球菌RN4220进行修饰，提取质粒后电转用于构建缺失突变的临床分离MRSE，经同源重组后筛选和鉴定psm-mec缺失突变株。分析缺失突变株与野生株生物被膜形成能力的差异，验证psm-mec与MRSE生物被膜的关系。结果通过序列比对和药敏试验筛选和鉴定了3株用于构建psm-mec缺失突变的临床分离MRSE。通过同源重组，筛选和鉴定获得psm-mec缺失突变株。与相应的野生株比较，3株缺失突变株生物被膜形成能力明显降低，提示psm-mec可诱导MRSE生物被膜形成。结论成功获得耐甲氧西林表皮葡萄球菌psm-mec缺失突变株，psm-mec与表皮葡萄球菌生物被膜形成相关。