小鼠骨髓来源肥大细胞的诱导培养及功能鉴定

• 作者: 何颖 关志澳 张可俊 李林梅 王珊 石任任 肖春梅 邹泽红 陶爱林
• 来源期刊: 东南大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 肥大细胞 骨髓 组胺检测 诱导培养 小鼠
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 684-688
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.11
• 字数: 3493字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6264.2015.05.002

摘要

目的：探讨体外诱导培养小鼠骨髓细胞来源肥大细胞的方法，为体外组胺激发试验提供试材。方法：采用白细胞介素3（IL-3）和干细胞因子（SCF）联合刺激小鼠骨髓细胞4、6周诱导其分化为肥大细胞，光镜下观察细胞形态，甲苯胺蓝染色观察细胞成熟度，蛋白免疫印迹法分析表面 FcεRⅠ和CD117表达情况， HistaReader 501组胺仪检测细胞脱颗粒能力。结果：诱导培养4、6周后的细胞为大小均一且具折光性的圆形悬浮细胞；甲苯胺蓝染色显示培养4、6周后的细胞胞核染为蓝色，胞质含有丰富的粗大紫红色颗粒，镜下统计成熟肥大细胞比例达85％以上；蛋白免疫印迹法分析发现培养4、6周后的细胞皆表达FcεRⅠ和CD117，其中培养6周的细胞FcεRⅠ表达水平更高；组胺仪检测培养6周的细胞发现，经浓度为100、500、1000μmol· L －1的钙离子载体刺激后，与阴性对照组相比，细胞组胺释放量依次为3.86％、17.04％及23.47％（ P＜0.05），其脱颗粒具有钙离子载体浓度依赖性。结论：获得大量高纯度的小鼠骨髓来源肥大细胞，可促进后期的组胺激发试验及Ⅰ型变态反应机制研究。