流动注射-分光光度法测定天然产物对酪氨酸酶活性的影响

• 作者: 刘文杰 卢亚玲 孟庆艳 李国柱 王立军 罗碧
• 来源期刊: 分析测试学报
• 学科: 化学
• 关键词: 流动注射-分光光度法 天然产物 酪氨酸酶活性
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 407-413
• 页数: 7页
• 分类号: O657.32|TQ041
• 字数: 4581字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-4957.2015.04.006

摘要

建立了一种快速、灵敏且高精度的流动注射-分光光度法用于研究天然产物对酪氨酸酶活性的影响.此方法基于一定介质条件下L-3,4-二羟基苯丙氨酸(L-DOPA)在酪氨酸酶的作用下,发生氧化生成棕褐色多巴醌,其最大吸收峰位于475 nm处,而酪氨酸酶抑制剂能降低酶促反应速度,减少多巴醌形成的量,从而降低475 nm下的吸光度值,形成倒峰.在优化实验条件下,半抑制浓度的曲酸抑制酪氨酸酶活性测定相对标准偏差(n=l0)为0.036％,与分光光度法和酶标仪微量法相比,精密度提高了10倍以上.咖啡酸对酪氨酸酶有较强的激活作用,对二酚酶相对激活率达到50％时的浓度(IC50)为0.170 mmol/L;薰衣草花水相提取物具有较强的抑制活性,其IC50值为0.96 mg/mL.与分光光度法及酶标仪微量法相比,流动注射-分光光度法精密度高,重复性好,适用于天然产物对酪氨酸酶活性影响的测定.