应用Ion Torrent半导体测序技术检测常染色体显性多囊肾患者PKD1基因致病突变

• 作者: 张菁菁 成建 王玉国 罗春玉 胡平 蒋涛 许争峰 马定远
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 关键词: 多囊肾,常染色体显性 TRPP阳离子通道 突变
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 27-31
• 页数: 5页
• 字数: 4317字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2015.01.008

摘要

目的 基于Ion Torrent半导体测序技术建立常染色体显性多囊肾患者PKD1基因致病突变检测方法并评价其临床应用价值.方法 遗传病分子诊断.收集2013年7月至2014年8月在南京市妇幼保健院就诊的多囊肾患者5例,提取外周血DNA,采用9个长链PCR反应特异性扩增PKD1基因全部编码区,PCR产物混合后进行酶切,经模板制备、乳液PCR和磁珠颗粒富集,应用Ion Torrent个体化基因组测序仪进行PKD1基因测序,对发现的致病突变通过Sanger测序验证.结果 应用Ion Torrent半导体测序技术检测到4例患者存在PKD1基因致病突变,分别为外显子12微小缺失突变(c.2966_2970delCGGCG),外显子15微小缺失突变(c.5014_5015delAG),内含子23剪接位点突变(c.8972-2A＞ G),外显子36错义突变(c.10675G＞ A).结论 基于长链PCR技术和Ion Torrent 半导体测序技术,建立了常染色体显性多囊肾病基因诊断方法,该方法能够特异性检测PKD1基因致病突变,具有较高的临床应用价值.