LAMP法在水牛早期胚胎性别鉴定中的应用

• 作者: 付强 张明 李敏玲 段亚萍 潘宏 陈富美
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 水牛 早期胚胎 性别鉴定 LAMP法 化学裂解
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 1106-1110
• 页数: 5页
• 分类号: S823.83
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2015.6.1106

摘要

[目的]建立LAMP法快速鉴定水牛早期胚胎性别体系,为预知性别水牛胚胎移植奠定基础.[方法]分别采用化学裂解法和非化学裂解法提取水牛早期胚胎DNA,对比不同方法对G3PDH基因扩增效果的影响;基于水牛SRY基因和12S rRNA基因分别设计雄性特异性引物及雌、雄性共用引物用于LAMP法胚胎性别鉴定,同时以PCR对LAMP法鉴定结果进行验证.[结果]化学裂解法对水牛早期胚胎DNA具有良好的裂解效果,其有效检出率为94.1％.优化的LAMP法对水牛早期胚胎性别鉴定的准确率与检出率均为100.0％,检测灵敏度为2×105 ng.LAMP扩增产物中加入1％ SYBR greenI,于紫外光下观察,阳性呈绿色,阴性呈淡黄色;自然光下观察,阳性呈黄色,阴性呈橙色.以LAMP法对37枚水牛ⅣF早期胚胎性别进行鉴定,其中雄性为28枚,雌性为9枚.PCR验证结果与LAMP法鉴定结果一致.[结论]用化学裂解法提取水牛早期胚胎DNA,再根据水牛SRY基因及12S rRNA基因设计引物进行LAMP法水牛胚胎性别鉴定切实可行.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	付强		7	32	3.0	5.0
2	张明		4	27	2.0	4.0
3	李敏玲		2	12	1.0	2.0
4	潘宏		1	11	1.0	1.0
5	段亚萍		1	11	1.0	1.0
6	陈富美		1	11	1.0	1.0