淫羊藿苷促SD大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化作用的实验研究

• 作者: 偶晨 傅淑平 张荣华 杨丽 洪浩
• 来源期刊: 中国中西医结合杂志
• 关键词: 淫羊藿苷 骨髓间充质干细胞 骨向分化 核心结合蛋白因子 骨钙素
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 839-846
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7661/CJIM.2015.07.0839

摘要

目的 观察淫羊藿苷促SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)骨向分化的作用特点.方法 (1)采用机械分离及全骨髓贴壁法分离培养SD大鼠BMSCs,氨基安替吡啉测酚法检测不同浓度的淫羊藿苷在第3、6、9、12、15、18、21天对细胞上清液中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的影响,采用茜素红染色法检测各浓度组BMSCs矿化情况,观察不同浓度的淫羊藿苷促BMSCs骨向分化的作用.(2)将BMSCs细胞分为空白对照组、成骨诱导组及淫羊藿苷组(0.5 μg/mL),在培养第7、14、21天检测各组细胞上清ALP活性,并于第14及21天分别检测各组细胞ALP阳性染色率与矿化结节数,同时采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测3个不同时间点各组细胞中核心结合蛋白因子(Runt-related transcripition factor-2,Runx2)及骨钙素(Osteocalcin) mRNA的表达水平.结果 (1) 0.05～5.0 μg/mL淫羊藿苷均可明显提高细胞上清液中ALP活性,其中0.2～2.0 μg/mL浓度组细胞结节数亦明显增加(P＜0.01).(2)淫羊藿苷促BMSCs骨向分化时,Runx2 mRNA表达水平及ALP活性均先升后降;Osteocalcin mRNA表达水平则持续上升(P＜0.01);与成骨诱导组比较,作用14天后,淫羊藿苷组ALP活性及ALP阳性染色率均明显提高(P ＜0.05,P＜0.01).结论 淫羊藿苷通过上调Runx2基因的表达,促使BMSCs向成骨细胞分化,并通过增加细胞ALP分泌及Osteocalcin基因的表达,促进细胞矿化的发生,从而促使新生成骨细胞的成熟.