利用pGhost系统筛选抗后酸化保加利亚乳杆菌

• 作者: 卢海强 李晨 田洪涛 罗云波 赵云 郭兴华 郭鑫
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: pGhost系统 抗后酸化 保加利亚乳杆菌 复制转座
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 应用技术
• 页码范围: 56-62
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2015.04.007

摘要

目的:利用pGhost系统构建抗后酸化保加利亚乳杆菌.方法:利用载体pGhost9:ISS1经复制型转座构建突变体,之后在pH 4.3条件下,突变细胞用含终质量浓度2000 μg/mL青霉素处理5h.将处理后的菌液涂布在含终质量浓度2 μg/mL红霉素的MRS平板上,长出的菌落分别点种pH 4.3和pH 6.5的MRS平板进行筛选,在低pH值条件下生长不良或不生长的菌株即目的菌株.经进一步检验,筛选发酵性能与出发菌株相当,而贮藏期后酸化能力大为减弱的菌株.将筛选出的抗后酸化菌株通过低温刺激,使转座后的载体重组,载体部分从染色体上切除,并经高温培养后丢失.剔除载体后的突变型菌落是食品级突变体,为红霉素敏感型.结果:获得3株抗后酸化保加利亚乳杆菌菌株,其生物学性状稳定,回复突变率低.