刃天青还原法检测细粒棘球绦虫原头蚴总数

• 作者: 刘辉 杨宁 林仁勇 温浩 王建华 肖云峰 若山古丽·肉孜 赵军 高惠静
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 刃天青 细粒棘球绦虫 原头蚴 总数检测
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 334-339
• 页数: 6页
• 分类号: R383.3
• 字数: 3750字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2015.04.009

摘要

目的 建立刃天青还原法体外检测细粒棘球绦虫存活原头蚴总数的实验方法.方法 根据刃天青在活细胞线粒体酶作用下被还原成强荧光物质的原理,将体外培养的原头蚴,用2 mg/mL刃天青染色10h后,用荧光分光光度计(激发光波长在560 nm,发射长590 nm)测定荧光值,并利用激光扫描共聚焦显微镜形态观察,通过统计学方法建立活原头蚴总数与对应的荧光值之间的数学模型,用于存活原头蚴总数的检测.结果 激光扫描共聚焦显微镜观察发现,死亡的原头蚴经刃天青染色没有荧光,活的原头蚴经刃天青染色发出红色荧光.活原头蚴总数与对应的荧光值呈线性关系,建立直线方程y=0.019x+6.453,在检验中将测得的荧光值(y)带入该公式即可获得活原头蚴总数,此数学模型相关系数r=0.994,P＜0.01,说明每个浓度下活原头蚴总数与每个浓度对应的荧光值之间的相关系数r极显著.结论 本研究建立了刃天青还原法体外快速检测细粒棘球绦虫存活原头蚴总数的实验方法,该方法可应用于抗包虫病药物体外筛选,具有避免人为误差、降低人力消耗等优点.