重组人源胶原蛋白的分离纯化及其结构表征

• 作者: 仲昭财 周爱梅 张静 杨树林 邓爱鹏 高力虎
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 重组人源胶原蛋白(RHSC) 基因工程菌 高密度发酵 分离纯化 结构表征
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 46-52
• 页数: 7页
• 字数: 4013字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201503008

摘要

采用巴氏毕赤酵母基因工程菌GS115/pPIC9KG6进行高密度发酵,获得细胞外分泌型重组人源胶原蛋白(recombinant human-source collagen,RHSC).SDS-PAGE电泳分析证明:RHSC具有确定的分子质量,分别约为56 kDa的蛋白单体与112 kDa的二聚体.实验中运用透析法、盐析与柱层析结合法对工程菌的发酵上清液进行纯化,结果如下:(1)透析法——最佳条件为4℃,透析24 h,RHSC单体与二聚体混合物回收率接近100％,纯度82.5％.(2)盐析-柱层析结合法——发酵上清液通过40％饱和度硫酸铵沉淀与Sephadex G100纯化后获得二聚体,达到了电泳纯.通过DSC、紫外光谱、红外光谱与核磁共振波谱对分离纯化得到的RHSC进行结构表征,与标准Ⅲ型胶原蛋白比对,确定RHSC具有Ⅲ型胶原蛋白的特征结构.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨树林	南京理工大学生物工程研究所	70	959	17.0	28.0
2	张静	南京理工大学生物工程研究所	20	106	6.0	10.0
3	高力虎	南京理工大学生物工程研究所	3	34	3.0	3.0
4	周爱梅	南京理工大学生物工程研究所	3	8	2.0	2.0
5	邓爱鹏	南京理工大学生物工程研究所	2	14	2.0	2.0
6	仲昭财	南京理工大学生物工程研究所	1	6	1.0	1.0