乳糖诱导纤维二糖差向异构酶的表达及热处理纯化

• 作者: 华霄 张文斌 杨瑞金 汪明明 沈秋云 赵伟
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 纤维二糖差向异构酶(CsCE) 乳果糖 乳糖 诱导表达 热处理纯化
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 字数: 5143字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201503001

摘要

以CaldiceUulosiruptor saccharolyticus纤维二糖差向异构酶(CsCE)高效表达菌株E.coli BL21(DE3)为表达载体,研究乳糖替代异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导CsCE表达的效果.结果表明,在菌体培养至OD600=0.6时加入终浓度为10 g/L的乳糖,25℃下诱导20 h,最终发酵液中CsCE酶活达801 U/L,较最优条件下IPTG诱导的酶活力提高1.4倍,粗酶液的比酶活提高37％.然后,根据CsCE的热稳定性,采用热处理工艺对粗酶液进行纯化.经70 ℃、2h热处理,绝大部分的杂蛋白变性沉淀,粗酶液中可溶性蛋白浓度降低85.9％,比酶活由0.89 U/mg提高到5.46 U/mg,纯化倍数达到6.14倍,酶活回收率为86.6％.乳糖诱导CsCE的高效表达结合热处理的初步纯化工艺,为CsCE的工业化生产提供有益的借鉴.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨瑞金	江南大学食品学院	170	1963	23.0	35.0
5	赵伟	江南大学食品学院	110	688	15.0	20.0
6	华霄	江南大学食品学院	67	411	11.0	16.0
7	张文斌	江南大学食品学院	87	710	15.0	21.0
8	汪明明	江南大学食品学院	3	6	2.0	2.0
9	沈秋云	江南大学食品学院	2	5	1.0	2.0