基于竞争触发滚环扩增的荧光适配体传感器高灵敏检测凝血酶

• 作者: 俞汝勤 刘学文 张松柏 沈国励 沈广宇 胡霞 郑丽英
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 核酸适配体 滚环扩增 分子信标 荧光 凝血酶
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 特摇 约摇 来摇 稿
• 页码范围: 1688-1694
• 页数: 7页
• 字数: 4835字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11895/j.issn.0253-3820.150527

摘要

利用目标蛋白、适体探针、挂锁探针和与适体探针匹配的互补序列之间的竞争反应,发展了一种基于滚环扩增的高灵敏荧光适配体传感器。在不含目标蛋白时,互补序列由于与适体探针杂交形成双链,因此不能与挂锁探针杂交以触发连接-滚环放大反应。相反,有目标蛋白存在时,由于目标蛋白与适体探针结合,使得互补序列被置换下来,从而可以与挂锁探针杂交。在DNA连接酶的作用下,挂锁探针被进一步环化并在Phi 29 DNA聚合酶的作用下发生滚环扩增反应。扩增产物含有许多能与分子信标检测探针环状部分杂交的重复序列,从而分子信标被打开产生荧光信号。对互补序列的长度及挂锁探针的浓度进行了考察。在优化的实验条件下,本传感系统可以实现对的凝血酶高灵敏检测,线性范围为0.067~32 nmol/L,检出限为0.03 nmol/L(约90 amol目标分子)。通过设计不同的适体探针和相关核酸序列,本传感系统可以作为一种通用型方法用于其它目标物的分析。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡霞	湖南文理学院化学化工学院	44	109	6.0	8.0
2	沈国励	湖南大学化学化工学院	110	1186	16.0	28.0
3	俞汝勤	湖南大学化学化工学院	131	1452	19.0	32.0
4	刘学文	湖南文理学院化学化工学院	22	28	3.0	4.0
5	郑丽英	湖南文理学院化学化工学院	14	79	5.0	8.0
6	张松柏	湖南文理学院化学化工学院	21	37	4.0	5.0
7	沈广宇	湖南文理学院化学化工学院	13	37	4.0	6.0