溶藻弧菌转运蛋白TolB的免疫原性与免疫保护性

• 作者: 丁燏 吴灶和 周泽军 庞欢瑛 张燕飞 李静 简纪常 邱明生
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 溶藻弧菌 tolB基因 免疫原性 免疫保护
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 143-149
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.021

摘要

旨在研究溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)HY9901转运蛋白TolB作为疫苗候选抗原的可能性,根据已发表的全基因组序列,设计特异性引物PCR扩增tolB的基因全长序列.序列分析显示,该基因(GenBank登录号JQ846501)全长1 353 bp,共编码450个氨基酸残基.BLAST分析发现,溶藻弧菌tolB基因与其他已知弧菌的tolB具有较高的同源性,序列保守,可作为共同抗原候选蛋白.用原核表达的tolB蛋白免疫SPF级小鼠,制备多克隆抗体,ELISA效价达1∶40000.免疫印迹表明鼠抗tolB血清能与诱导后的重组蛋白发生特异反应.为进一步研究tolB对石斑鱼(Epinephelus awoara)的免疫保护性,用TolB蛋白两次免疫石斑鱼,ELISA检测发现,免疫石斑鱼血清的抗体效价在第4周达到峰值(1∶2048).攻毒实验结果表明TolB对石斑鱼的免疫保护率为76％.结果表明,溶藻弧菌转运蛋白TolB具有较好的免疫原性和免疫保护性,可作为弧菌亚单位疫苗的候选抗原.