沉默Bmi-1基因对CD44+鼻咽癌类肿瘤干细胞增殖调控的影响

• 作者: 任精华 刘洋 易芳 李道俊 胡娟 苏进 许新华 陈卫红 鲁明骞
• 来源期刊: 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Bmi-1基因 CD44 鼻咽癌 类肿瘤干细胞
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 941-947
• 页数: 7页
• 分类号: R739.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.13201/j.issn.1001-1781.2015.10.020

摘要

目的:探讨应用RNAi沉默Bmi-1基因对CD44+鼻咽癌类肿瘤干细胞增殖调控的影响.方法:构建靶向Bmi-1基因的短发卡RNA慢病毒(LV-Bmi-1shRNA),感染通过流式细胞仪分选的CD44+鼻咽癌细胞;利用荧光显微镜及流式细胞仪检测感染效率;Real-time PCR及Western blot方法检测Bmi-1及其下游基因mRNA与蛋白表达;CCK-8增殖实验检测细胞增殖;成球实验检测成球能力;平板克隆形成实验检测克隆形成能力;流式细胞仪分析各组细胞周期分布情况.结果:LV-Bmi-1 shRNA感染效率达95％以上;与空载体组和空白对照组相比,实验组Bmi-1 mRNA及蛋白表达明显下调(P＜0.05),而其下游基因p16INK4a、p14ARF mRNA及蛋白则上调;实验组的增殖、克隆形成及成球能力均明显降低;G0/G1期细胞比率增加,G2/M及S期比率降低.结论:Bmi-1基因沉默可抑制CD44+鼻咽癌类肿瘤干细胞的增殖、克隆形成及自我更新能力,使细胞周期发生阻滞,其作用可能是通过Bmi-1-p16INK4a/p14ARF-p53通路介导的.表明Bmi-1基因可能对CD44+鼻咽癌细胞干性样特征的维持有重要作用,并由此可能成为鼻咽癌治疗的一个潜在新靶点.