生物反应器内微载体培养细胞的胰酶消化放大技术

• 作者: 孙振鹏 孙燕 孟子新 李欢 李薇 范秀娟 赵星文
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 生物反应器 微载体 细胞培养
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 628-632
• 分类号: R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 建立生物反应器内微载体上Vero细胞球转球胰酶消化放大技术.方法 用500 ml搅拌瓶培养Vero细胞,待细胞浓度达1.8× 106个/ml时,加入25和37℃消化液(0.25％胰酶+0.02％ EDTA)消化不同时间,计算细胞回收率及细胞活率,筛选微载体细胞最佳培养温度及消化时间.将3L反应器内微载体及T25方瓶培养的Vero细胞消化后接种T25方瓶,比较两种传代方式下的细胞形态及比生长速率.将3L反应器内微载体培养的Vero细胞用消化液消化后,按1∶3、1∶6、1∶8、1∶10、1∶12的比例接种至15 L反应器,确定最适接种比例.将转瓶及3L反应器内微载体培养的Vero细胞消化后接种至15 L反应器,比较两种放大方式下的细胞形态、密度及比生长速率.结果 微载体上培养的Vero细胞经25℃消化15 min可有效保证细胞的回收率及活率.两种传代方式下的细胞形态及比生长速率无明显区别.细胞比生长速率在1∶6～1∶10比例放大时较高.两种放大方式下的细胞形态、密度及比生长速率无明显区别.结论 初步建立了生物反应器微载体内细胞的胰酶消化球转球放大技术,Vero细胞存活率较高,贴壁良好,空珠率较低,可应用于生物反应器微载体培养系统的规模放大.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李薇		19	91	7.0	9.0
2	孙振鹏	兰州生物制品研究所有限责任公司第六研究室	9	47	4.0	6.0
3	赵星文	兰州生物制品研究所有限责任公司第六研究室	4	38	3.0	4.0
4	孙燕	兰州生物制品研究所有限责任公司第六研究室	10	35	4.0	5.0
5	范秀娟	兰州生物制品研究所有限责任公司第六研究室	6	16	3.0	4.0
6	李欢	兰州生物制品研究所有限责任公司第六研究室	2	21	2.0	2.0
7	孟子新	兰州生物制品研究所有限责任公司第六研究室	1	3	1.0	1.0