为检测内蒙古地区某牛场患乳房炎的奶牛乳样中是否存在牛支原体,同时建立直接提取乳样中牛支原体 DNA 进行 PCR 检测的方法,本研究无菌采集乳房炎乳样,通过支原体的分离培养、形态学观察和生化试验,初步鉴定分离株为牛支原体,然后提取液体培养基菌体 DNA 进行牛支原体特异性 PCR 鉴定,同时,采用 Chelex-100法直接提取原乳样中菌体 DNA 进行 PCR 鉴定,并测序分析扩增片段序列。液体培养物提取 DNA 与 Chlex-100法直接提取原乳样菌体 DNA 进行特异性 PCR 均扩增出目的条带,该片段序列与 GenBank 中牛支原体 oppD/oppF 基因的同源性达到99.8%,证实分离株为牛支原体。说明 Chlex-100法可直接提取乳样中牛支原体 DNA 进行快速 PCR 鉴定。