摘要:
目的 观察大鼠角膜在胚胎期及生后发育期缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)的表达,探讨HIF-1α与角膜发育之间的关系.方法 取实验用Wistar大鼠分为8组:胚胎12 d(E12)、胚胎16 d(E16)、胚胎20 d(E20)、生后1 d(P1)、生后7 d(P7)、生后15 d(P15)、生后21 d(P21)、成年组,每组3只鼠6眼,共48眼.每只鼠取一眼,采用免疫组织化学方法检测HIF-1α的表达,另一眼采用实时荧光定量PCR方法检测角膜组织中HIF-1α mRNA的表达(E12、E16时鼠胚眼球较小,无法分离角膜组织,未行PCR检测).结果 免疫组织化学染色结果显示,大鼠在角膜发育过程中,HIF-1α的表达存在时空变化.E12时,由表面外胚层分化的两层细胞内可见明显棕黄色颗粒.E16时,分化形成的上皮层、基质层、内皮层中HIF-1α阳性表达显著.E20时,棕黄色颗粒集中表达在上皮层、内皮层,基质层染色较弱.P1、P7时,大鼠眼睑粘连,角膜各层中HIF-1α维持少量表达,上皮、内皮细胞较基质细胞染色明显.P15时,HIF-1α在上皮层阳性着色尤其强烈,细胞核、细胞浆棕黄色颗粒明显,基质层未见阳性着色,内皮层见少量细胞核着染.P21时,HIF-1α的阳性表达更加集中在上皮层基底细胞,基质层、内皮层表达阴性.成年组,角膜中仅在上皮基底细胞见HIF-1α阳性表达,余未见阳性.实时荧光定量PCR显示HIF-1αmRNA在角膜发育期各组表达量不同,差异有统计学意义(F =97.00、P<0.05).P1组与E20组之间,成年组与P21组之间比较,差异均无统计学意义(P=0.20、0.05),其余各组间差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论 HIF-1α在大鼠角膜发育过程中存在阳性表达,且随发育时期不同表达部位、表达量发生变化.HIF-1α可能在角膜各层分化、细胞分裂过程中发挥重要作用.