微孔板法检测肺炎球菌多糖中甲基戊糖含量

• 作者: 刘方蕾 刘爱萍 吴兵 孔素娟 李献林 王晶 王欣茹 胡浩 袁菲
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微孔板 肺炎球菌多糖 甲基戊糖
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 1072-1076
• 分类号: R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 微孔板法检测肺炎球菌多糖中甲基戊糖含量,并对该方法进行验证.方法 将常规甲基戊糖测定法应用于微孔板,并优化盐酸半胱氨酸浓度.对建立的方法进行线性、精密度及准确度的验证.用建立的方法检测肺炎球菌多糖样品中甲基戊糖含量及多糖衍生物的分子量分布.结果 最佳的盐酸半胱氨酸浓度为15 mg/ml.标准品L-鼠李糖在5～ 30 μg/ml范围内,其浓度与(A396-A430)值呈良好的线性关系,R2＞0.999;批内及批间CV值分别为0.9％～1.1％及2.2％～3.2％;加入2.5、5、10μg/ml L-鼠李糖的6B型原糖及多糖衍生物中的甲基戊糖含量的回收率为91.73％ ～ 100.70％.微孔板法及常规方法测定的肺炎球菌多糖中甲基戊糖含量无明显差异(P＞0.05),微孔板法测定多糖分子量分布与常规方法有较好的一致性.结论 微孔板法可有效、准确、稳定地检测肺炎荚膜多糖及其衍生物中甲基戊糖含量,该方法灵敏度高,操作简便快捷,节约样品、试剂等材料,适用于疫苗生产过程中的质量控制.