生物反应器微载体规模化培养轮状病毒重配株LH9

• 作者: 包红 孙振鹏 孙燕 李薇 王名强 范秀娟
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 生物反应器 微载体 轮状病毒
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 528-530,535
• 分类号: R373.2+4|R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 利用Vero细胞生物反应器微载体培养技术规模化培养轮状病毒重配株LH9(G4型).方法 用3L生物反应器,以4g/L载体浓度培养Vero细胞,待细胞浓度达1.8× 106个/ml时,分别用含2、1、0.75、0μg/ml胰酶的DMEM培养液,35 ℃连续培养21d,观察细胞生长状态.分别按0.5、0.1、0.05、0.01 MOI接种轮状病毒重配株LH9(G4),培养过程中每日取样,检测病毒滴度以及葡萄糖、乳酸含量.根据培养过程中葡萄糖、乳酸含量的变化,确定病毒培养过程中的收获时间,优化培养工艺.结果 在反应器中用含不同浓度胰酶的DMEM培养Vero细胞,细胞形态良好,与不含胰酶的DMEM培养液培养的细胞无明显差异;按0.05 MOI接种后的病毒收获液滴度较高,可达7.0 lgCCID50/ml,且持续时间较长;通过对病毒培养液中葡萄糖、乳酸含量的监测,调整了培养过程中的收获时间,收获次数增加至4次,可收获病毒液4个工作体积,病毒高峰滴度可达8.5 lgCCID50/ml.结论 采用生物反应器微载体系统培养轮状病毒重配株LH9(G4),可显著提高病毒滴度,通过对培养过程的优化,增加了病毒收获量,为进一步规模化生产轮状病毒疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李薇	兰州生物制品研究所有限责任公司第六研究室	19	91	7.0	9.0
2	孙振鹏	兰州生物制品研究所有限责任公司第六研究室	9	47	4.0	6.0
3	包红	兰州生物制品研究所有限责任公司第六研究室	20	44	4.0	4.0
4	孙燕	兰州生物制品研究所有限责任公司第六研究室	10	35	4.0	5.0
5	王名强	兰州生物制品研究所有限责任公司第六研究室	10	26	3.0	4.0
6	范秀娟	兰州生物制品研究所有限责任公司第六研究室	6	16	3.0	4.0