铁过载及脂质过载对RAW264.7细胞铜蓝蛋白表达的影响

• 作者: 乔彤 王旗 计佳杰
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 泡沫细胞 血浆铜蓝蛋白 铁排出 动脉粥样硬化
• 年，卷（期）: 2015,（32）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2639-2643
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2015.32.016

摘要

目的 研究巨噬细胞RAW264.7在铁积累及脂质积累的环境中其铜蓝蛋白表达量的变化.方法 利用脂多糖(LPS)、柠檬酸铁铵(FAC)、去铁胺(DFO)及氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)处理RAW264.7细胞,模拟炎症、铁过载及脂质过载的环境.利用蛋白免疫印迹、实时荧光定量PCR检测细胞铁代谢相关蛋白的表达水平,包括铁蛋白(Ft)、转铁蛋白受体(TfR)、铁排出蛋白(FPN1)及铜蓝蛋白(Cp).利用胺氧化试验检测Cp的氧化活性.利用胆固醇酶法观察ox-LDL处理后RAW264.7细胞脂质过载的情况.结果 Western blot显示FAC处理细胞后,FPN1、Ft表达量显著上升,TfR表达量降低;LPS+ FAC处理细胞后,其Cp的mRNA水平提高(t=-5.995,P=0.019),细胞表达的Cp活性显著提高(t=-9.875,P=0.001).ox-LDL刺激细胞后,蛋白免疫印迹显示细胞Cp表达降低.LPS+ ox-LDL+ FAC处理后,RAW264.7细胞Cp的mRNA水平(t=8.948,P=0.001)、氧化功能(t =6.663,P=0.003)及蛋白水平较LPS+ FAC组有显著降低,且蛋白免疫印迹显示,LPS+ox-LDL+ FAC组细胞Ft的表达量较LPS+ FAC组有升高.结论 RAW264.7细胞在炎症及铁过载的条件下,会出现Cp的高表达,提示Cp在RAW264.7细胞应对炎症及铁过载过程中发挥了较为重要的作用.脂质及铁负载的RAW264.7细胞其Cp的表达出现了显著的异常,且Cp的低表达会加重RAW264.7细胞的铁过载.