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高羊茅黔草1号SAMDC基因的克隆及植物表达载体的构建
高羊茅黔草1号SAMDC基因的克隆及植物表达载体的构建
作者:
吴佳海
曾庆飞
李小冬
杨春燕
王小利
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
SAMDC
基因克隆
过表达载体
农杆菌导入
摘要:
采用高保真平末端法从高羊茅“黔草1号”(Festuca arundinacea cv.Qiancao No.1)叶片cDNA中扩增S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因(SAMDC)序列.基因测序分析表明,扩增片段含有1 835个核苷酸,包含有9 bp的微型上游阅读框、147 bp的小型上游阅读框和1 185 bp的主阅读框.微型上游阅读框和小型上游阅读框存在一个碱基重叠,主阅读框编码395个氨基酸.整个克隆片段与GenBank上注册的高羊茅FaSAMDC基因的核苷酸同源性为95.05%,编码氨基酸的同源性为98.22%.利用KpnⅠ和PstⅠ酶切位点将该片段插入到经贵州省草业研究所分子生物学实验室改造过的pCAMBIA1300植物表达载体的多克隆位点内,经琼脂糖凝胶电泳检测、酶切鉴定和序列测定,获得具有SAMDC基因和潮霉素抗性基因的适合于单子叶植物遗传转化的表达载体pCAM SAM-DC.通过冻融法将构建的重组质粒导入根癌农杆菌GV3101和EHA105感受态细胞中,并通过PCR反应对所获得的工程菌株进行鉴定,为进一步通过农杆菌介导法培养抗逆未草新材料奠定了基础.
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文献信息
篇名
高羊茅黔草1号SAMDC基因的克隆及植物表达载体的构建
来源期刊
草业科学
学科
生物学
关键词
SAMDC
基因克隆
过表达载体
农杆菌导入
年,卷(期)
2015,(8)
所属期刊栏目
植物生产层
研究方向
页码范围
1237-1242
页数
6页
分类号
Q943.2
字数
3819字
语种
中文
DOI
10.11829\j.issn.1001-0629.2014-0573
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
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1
吴佳海
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王小利
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李小冬
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曾庆飞
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杨春燕
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基因克隆
过表达载体
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研究来源
研究分支
研究去脉
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期刊影响力
草业科学
主办单位:
中国草原学会
兰州大学草地农业科技学院
出版周期:
月刊
ISSN:
1001-0629
CN:
62-1069/S
开本:
大16开
出版地:
兰州市嘉峪关西路768号
邮发代号:
54-51
创刊时间:
1984
语种:
chi
出版文献量(篇)
7019
总下载数(次)
17
总被引数(次)
75005
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