白细胞介素-1β对大鼠软骨细胞MMP-13表达的影响及miR-27b的调控作用

• 作者: 王欣 秦宇
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 软骨细胞 基质金属蛋白酶13 微RNAs 白细胞介素1β 微阵列分析 微小RNA-27b
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 871-875
• 页数: 5页
• 分类号: R349.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/j.issn.0253-9896.2015.08.011

摘要

目的：观察白细胞介素（IL）-1β对大鼠软骨细胞基质金属蛋白酶（MMP）-13表达的影响及miR-27b的调控作用。方法雄性Wistar大鼠7只提取软骨细胞。Western blot检测IL-1β刺激软骨细胞0 h、24 h、48 h各时间点MMP-13表达变化；miRNAs微阵列分析48 h内软骨细胞差异表达的miRNAs；Real-time PCR定量分析筛选出下调最为明显的miRNAs；荧光素酶报告基因实验验证miR-27b与MMP-13的靶定调控关系。结果 IL-1β刺激软骨细胞后，MMP-13蛋白在0 h、24 h、48 h各时间点表达逐渐增加（P<0.05）；miRNAs微阵列分析发现48 h内软骨细胞有36个miRNAs出现表达变化，变化最为明显的有6个，分别为miR-27b、miR-31、miR-26a、miR-26b、miR-23、miR-204；Real-time PCR显示miR-27b下调最为明显；miR-27b拟似物和荧光素酶表达质粒共转染软骨细胞后，荧光素酶活性受到明显抑制（P<0.05）。结论 IL-1β刺激软骨细胞后，出现miR-27b的表达下调和MMP-13蛋白的表达上调，miR-27b与MMP-13存在靶定调控关系。