重组人纤溶酶原激活剂转基因兔的制备及其表达产物的检测

• 作者: 宋绍征 成勇 祁正强 葛欣 邵宾 陆睿
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 转基因兔 人组织纤溶酶原激活剂(ht-PA) 乳腺特异性表达
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 216-221
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.10.033

摘要

人组织纤溶酶原激活剂（ht-PA）是临床血栓疾病治疗的主要生物药品，应用转基因动物乳腺生物反应器制备已有报道，但重组人纤溶酶原激活剂（rhPA）在转基因动物中表达尚未见报道。设计了以人t-PA的F、E、K1区位点缺失体为编码序列，以山羊β-酪蛋白/CMV杂合启动/增强子，构建了乳腺特异性表达载体PCL25/rhPA，通过受精卵原核显微注射法制备转基因兔。用PCR检测及其产物测序筛选转基因兔，ELISA试剂盒及纤维蛋白平板溶圈法检测转基因兔的表达产物。实验获得原代转基因兔5只（2♂，3♀），其中2只乳腺中表达人重组纤溶酶原激活剂，rhPA浓度最高可达400μg/mL，表达产物比活性是现有阿替普酶的150-200倍。实验结果表明，重组人纤溶酶原激活剂（rhPA）可以在山羊β-酪蛋白/CMV杂合启动/增强子调控下获得乳腺特异性表达，表达重组蛋白具有较高的溶栓活性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆睿		1	2	1.0	1.0
2	宋绍征		1	2	1.0	1.0
3	祁正强		1	2	1.0	1.0
4	葛欣		1	2	1.0	1.0
5	邵宾		1	2	1.0	1.0
6	成勇		1	2	1.0	1.0