小鼠脾脏B淋巴细胞纯化培养方法的建立

• 作者: 刘杰 李文娟 李海东 田志辉 邹家琦 韩欣欣
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 小鼠脾脏 B淋巴细胞 T淋巴细胞 培养 CD3单克隆抗体 白细胞介素4 脂多糖 流式细胞术 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 页码范围: 207-212
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 5256字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2015.02.009

摘要

背景：B淋巴细胞是机体免疫系统重要的参与者，目前的研究主要采用磁珠、补体等方法进行B淋巴细胞的分离纯化，但是这些方法费用高或者细胞损伤大、纯度低，体外分离、培养B淋巴细胞的方法还有待进一步改进。目的：探讨从小鼠脾脏细胞中对 B 淋巴细胞同时进行分离、培养的方法。采用加入白细胞介素4、脂多糖或者CD3单克隆抗体及其组合，探讨体外分离、培养小鼠脾脏B淋巴细胞的适宜条件。方法：体外分离培养小鼠脾脏细胞，随机分为7组，分别用白细胞介素4，CD3，脂多糖，白细胞介素4+CD3，白细胞介素4+脂多糖，CD3+脂多糖组进行干预、将未给予刺激的脾细胞作为对照组。用流式细胞仪检测在不同培养条件下小鼠脾脏细胞T、B淋巴细胞及其亚群的变化。结果与结论：与对照组比较，白细胞介素4组淋巴细胞在培养后第3-5天数量达到高峰；脂多糖组在培养初期无明显作用，第3天开始淋巴细胞数量有明显的增加，第5天达到高峰；培养体系中加入CD3单克隆抗体，可导致T淋巴细胞消失，培养2 d后，可得到较为单一的B淋巴细胞，其细胞数量在第3天达到高峰。其中B220+IgD+成熟B淋巴细胞亚群数量显著增加。体外培养24 h后，各组B220+CD93+Transitional B淋巴细胞亚群均完全消失。结果说明，体外培养的小鼠脾脏细胞加入CD3单克隆抗体和白细胞介素4可以去除T淋巴细胞，并维持成熟B淋巴细胞的生存和增殖。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘杰	天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系	10	29	4.0	5.0
2	田志辉	天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系	3	27	2.0	3.0
3	李海东	天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系	19	99	5.0	9.0
4	邹家琦	天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系	2	5	2.0	2.0
5	李文娟	天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系	2	5	2.0	2.0
6	韩欣欣	天津医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系	2	5	2.0	2.0