水牛卵母细胞玻璃化冷冻后孤雌激活方法的优化

• 作者: 卢克焕 卢晟盛 李敏玲 杨小淦 王彩玲 许惠艳 钟一治 陆阳清 陈美娟
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 水牛 卵母细胞 孤雌激活 玻璃化冷冻 离子霉素 6-DMAP
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 503-507
• 页数: 5页
• 分类号: S823.83
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j:issn.2095-1191.2015.3.503

摘要

[目的]了解玻璃化冷冻一解冻及不同孤雌激活条件对水牛卵母细胞发育潜能的影响,为构建完善的水牛卵母细胞孤雌激活培养体系奠定基础.[方法]利用玻璃化冷冻法对水牛体外成熟卵母细胞进行冷冻保存1～2d,解冻复苏后进行孤雌激活,以新鲜的体外成熟卵母细胞为对照,探讨离子霉素浓度、6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)浓度和处理时间对玻璃化冷冻复苏后水牛卵母细胞孤雌激活效果的影响.[结果]与新鲜的体外成熟卵母细胞相比,玻璃化冷冻—解冻复苏后水牛体外成熟卵母细胞孤雌激活的卵裂率、4-细胞率、8-细胞率和囊胚发育率均极显著降低(P＜0.01).水牛体外成熟卵母细胞经玻璃化冷冻—解冻复苏后,以3.5 μmol/L离子霉素激活5 min联合2mmol/L 6-DMAP培养2h的孤雌激活效果最佳,其卵裂率、4-细胞率、8-细胞率和囊胚发育率分别为60.6％、45.1％、33.7％和14.8％.[结论]水牛体外成熟卵母细胞经玻璃化冷冻—解冻复苏后,其激活阈值发生改变,因此不宜采用与新鲜体外成熟卵母细胞一致的激活程序进行孤雌激活.