Xist基因抑制对牛SCNT早期胚胎发育的影响

• 作者: 刘黎明 吴宝江 孙伟 张金吨 李喜和 李树裕 王标 胡树香 赵丽霞 陈杨林
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: Xist基因 TALER载体 胎牛成纤维细胞 克隆胚胎早期发育
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 214-219
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.01.033

摘要

Xist是与X染色体失活相关的非编码基因，它在合子期基因组开始表达，是胚胎发育早期表达的第一个印记基因。探讨了特异性抑制Xist的TALER-REPRESSOR（TALER）载体转染到胎牛成纤维细胞对Xist基因的抑制作用，并以抑制Xist基因表达的细胞作为核供体制作克隆胚胎，研究Xist基因抑制对牛克隆胚早期发育的影响。结果显示，与对照组细胞相比，TALER载体将Xist相对表达量下调了93.85%，说明本试验设计的载体转染系统能够有效抑制Xist基因的表达。选取Xist抑制表达阳性的转染细胞用于体细胞核移植试验，克隆胚胎发育结果显示，试验组和对照组的卵裂率、8细胞发育率、桑葚胚发育率和囊胚发育率分别为78.8% vs 75.1%（P>0.05，无显著差异）、54.4% vs 50.6%（P>0.05，无显著差异）、12.3% vs 27.8%（P<0.01，差异极显著）、0 vs 26.6%（P<0.01，差异极显著）。综上所述，试实验设计的特异性抑制Xist表达的TALER载体可有效抑制雌性胎牛成纤维细胞中Xist的表达。供体细胞Xist这种基因下调可使克隆胚胎2-8细胞率略有提升，但囊胚期和桑葚胚率明显降低。因此，其机制尚待于进一步探讨。