与蓖麻种子大小性状连锁的RAPD分析

• 作者: 刘浩 包春光 彭木 朱国立 杜娟 赵永 陈晓凤 黄凤兰
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 蓖麻 种子 大小 RAPD
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 页码范围: 108-114
• 页数: 7页
• 分类号: S565.6
• 字数: 3784字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2015.05.018

摘要

蓖麻种子大小因品种不同差异很大,目前尚未见与蓖麻种子大小性状发育相关的分子生物学研究.以32个不同大小的蓖麻种子作为研究材料,用U25(55)均匀试验设计法对种子大小性状的RAPD-PCR反应体系和条件进行优化.最佳反应体系为:25μL体系中10×Buffer 2.7 μL、dNTP 2.4 μL、Mg2+ 2.4 μL、DNA 1.7μL、引物1.9 μL、Taq polymerase 2.0 μL、ddH2O 11.9 μL.最佳反应条件为:94℃150 s;94℃45 s,39℃65 s,72℃90 s,35个循环;72℃10 min;4℃保存.用SB-002引物(碱基序列(5'-3'):TGCCGAGCTG),采用最佳的反应体系和条件在最大粒蓖麻种子中筛选到一个差异条带,测序结果在NCBI中进行比对,发现与高产粳稻基因组DNA、mRNA或cDNA同源性达到100％,因此推断所获差异条带与蓖麻种子产量有关,为蓖麻种子大小性状相关分子机理研究奠定了基础.