组织蛋白酶 D 绿色荧光蛋白复合质粒转染技术在慢性光损伤成纤维细胞研究中的作用

• 作者: 刘惠娴 叶聪秀 易金玲 许庆芳 赖维 郑跃 陈海燕
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 组织蛋白酶 D 成纤维细胞 质粒 细胞衰老 皮肤衰老 紫外线
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报道
• 页码范围: 876-879
• 页数: 4页
• 字数: 4235字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2015.12.013

摘要

目的：探讨组织蛋白酶 D 绿色荧光蛋白复合质粒（GFP-CatD）技术在成纤维细胞慢性光损伤研究中的作用。方法长波紫外线（UVA）25 J/cm2每天照射人皮肤成纤维细胞1次，共21 d，构建慢性光损伤成纤维细胞模型。构建 GFP-CatD 质粒，将其转染入慢性光损伤成纤维细胞，荧光显微镜观察绿色荧光标记的组织蛋白酶 D 表达，Western 印迹检测组织蛋白酶 D 表达，流式细胞仪检测转染 GFP-CatD 后的慢性光损伤成纤维细胞凋亡率，噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖率。结果慢性光损伤成纤维细胞转染 GFP-CatD 质粒96 h，可见绿色荧光蛋白组织蛋白酶 D 在慢性光损伤细胞胞质内表达。Western 印迹结果显示，慢性光损伤成纤维细胞转染 GFP-CatD 质粒后，组织蛋白酶 D 蛋白表达为未转染细胞的1.28倍。细胞凋亡检测结果发现，转染后的光老化成纤维细胞凋亡细胞率为4.29％±1.30％，与无转染的空白对照组凋亡细胞率3.03％±1.70％比较，差异无统计学意义（P >0.05）。MTT 细胞增殖检测结果发现，转染后的光老化成纤维细胞的细胞增殖率为45.20％±4.70％，无转染质粒的光老化成纤维细胞为43.60％±3.90％（P >0.05）。结论 GFP-CatD 复合质粒转染慢性光损伤成纤维细胞可示踪到组织蛋白酶 D 荧光蛋白，且不影响慢性光损伤成纤维细胞原有的正常生物活性和周期。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赖维	中山大学附属第三医院皮肤性病科	291	1353	17.0	24.0
2	陈海燕	中山大学附属第三医院皮肤性病科	55	237	9.0	14.0
3	刘惠娴	中山大学附属第三医院皮肤性病科	10	17	2.0	3.0
4	郑跃	中山大学附属第三医院皮肤性病科	59	181	6.0	11.0
5	许庆芳	中山大学附属第三医院皮肤性病科	47	176	7.0	9.0
6	叶聪秀	中山大学附属第三医院皮肤性病科	18	85	6.0	9.0
7	易金玲	中山大学附属第三医院皮肤性病科	17	88	6.0	8.0